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细胞培养基重要原料——氨基酸

氨基酸是一种分子中具有氨基(-NH2)和羧基(-COOH)的化合物,具有共同的基本结构并含有复合官能团,是构成蛋白质的基本单位。氨基酸可按照氨基连在碳链上的不同位置而分为α-,β-,γ-,ω-...氨基酸,但经蛋白质水解后得到的氨基酸都是α-氨基酸或亚氨基酸,根据其化学结构的不同,可以分为脂肪族、芳香族和杂环氨基酸。氨基酸作为在大规模细胞培养中不可缺少的成分之一,对细胞的状态,高密度的维持以及蛋白产量、质量都发挥着重要的作用。在细胞培养过程中,氨基酸会随细胞表达的蛋白不同而发生变化和消耗,通常需要在细胞培养工艺的不同阶段添加不同成分和比例的氨基酸进行补充。氨基酸化学式 氨基酸在细胞内的作用主要体现在以下几个方面:氨基酸作为蛋白质的基本组成单位,参与合成细胞内所有蛋白质,包括细胞骨架、酶、受体和信号分子等; 氨基酸可以用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物,如核酸、尼克酰胺等; 某些氨基酸还具有独特的生理作用,如甘氨酸参与生物转化作用,丙氨酸和谷氨酸参与细胞内氨的运输等; 氨基酸还可以转变成糖和脂肪,参与氧化途径并为细胞代谢提供能量。 下图展示了CHO细胞中氨基酸参与的细胞内代谢途径(绿色线条表示碳代谢途径,单字母表示氨基酸)。 图片来源:Kanehisa et al. 2014细胞能利用的氨基酸是L型同分异构体,D型氨基酸不能被利用。不同的细胞对氨基酸的需求各异,但根据细胞自身能否合成,可将常见的20种氨基酸分为必需氨基酸(Essential amino acids)和非必需氨基酸(Nonessential amino acids)。其中,必需氨基酸不能由细胞自身合成,只能从培养基中获取,包括组氨酸(L-Histidine)、异亮氨酸(L-Isoleucine)、亮氨酸(L-Leucine)、赖氨酸(L-Lysine)、甲硫氨酸(L-Methionine)、苯丙氨酸(L-Phenylalanine)、苏氨酸(L-Threonine)、色氨酸(L-Tryptophan)、缬氨酸(L-Valine)、半胱氨酸(L-Cysteine)、酪氨酸(L-Tyrosine)、精氨酸(L-Arginine)及谷氨酰胺(L-Glutamine),因此在细胞培养基配方中,必需氨基酸的浓度通常较高。非必需氨基酸(Nonessential amino acids)包括了丙氨酸(L-Alanine)、天冬氨酸(L- Aspartic acid)、天冬酰胺(L- Asparagine)、谷氨酸(L- Glutamic acid)、脯氨酸(L- Proline)、丝氨酸(L-Serine)、甘氨酸(Glycine),这些氨基酸虽然可以由细胞自身合成,或通过转氨作用由其他物质转化而来,但在细胞培养基中添加适当浓度的非必需氨基酸能减轻细胞在合成方面的负担,提高其他营养成分的利用率。除了上述20种编码蛋白质的氨基酸以外,在细胞培养基中常用到的还包括L-胱氨酸(由2个L-半胱氨酸以二硫键结合形成)和L-羟脯氨酸等。北京西美杰科技有限公司代理的Applichem品牌可提供品类齐全的高品质非动物源氨基酸系列产品,可满足生物制药企业大规模细胞培养的高标准级别需求,产品详情见下表。货号品名中文名称级别CAS No.A3198L-Alanyl-L-Glutaminefor cell cultureL-丙氨酰-L-谷氨酰胺细胞培养级39537-23-0A1345L-Arginine base L-精氨酸欧洲、美国药典74-79-3A1688L-AlaninL-丙氨酸欧洲药典56-41-7A1668L-Asparagin monohydratL-天冬酰胺,一水欧洲药典、美国药典5794-13-8A1701L-Aspartic AcidL-天冬氨酸欧洲药典、美国药典56-84-8A1702L-Cysteine hydrochloride monohydrateL-半胱氨酸盐酸盐,一水欧洲药典、美国药典7048-04-6A0622L-Cystinedihydrochloride pureL-胱氨酸盐酸盐化学纯30925-07-6A1704L-Glutamic AcidL-谷氨酸欧洲药典、美国药典56-86-0141340L-GlycineL-甘氨酸欧洲药典、美国药典56-40-6A1705L-Hydroxyproline pureL-羟基脯氨酸化学纯51-35-4A1440L-IsoleucineL-异亮氨酸欧洲药典、美国药典73-32-5A1426L-LeucineL-亮氨酸欧洲药典、美国药典61-90-5A1706L-LysinmonohydrochloridL-赖氨酸盐酸盐欧洲药典、美国药典657-27-2A1344L-PhenylalaninL-苯丙氨酸欧洲药典、美国药典63-91-2A1707L-ProlinL-脯氨酸欧洲药典、美国药典147-85-3A1708L-SerineL-丝氨酸欧洲药典、美国药典56-45-1A1419L-ThreoninL-苏氨酸欧洲药典、美国药典72-19-5A1645L-TryptophanL-色氨酸欧洲药典、美国药典73-22-3A1677L-TyrosineL-酪氨酸欧洲药典、美国药典60-18-4A1637L-ValineL-缬氨酸欧洲药典、美国药典72-18-4A1342L-Lysine 1-hydrateL-赖氨酸,一水德国药典 (DAB)39665-12-8PanReac AppliChem是来自欧洲品质优良的生物化学试剂与制药原料生产商之一,已通过多项ISO 9001质量体系认证,是全球科研、知名CRO企业、大型制药、诊断、食品、化妆品等工业企业的重要供应商。作为全球多家知名培养基生产企业和制药企业长期固定供应商,AppliChem全面提供细胞培养级、符合药典级、生化级、超纯级等培养基化学品组分,包括氨基酸、蛋白质、维生素、抗生素、脂类、无机盐、缓冲液、泡沫稳定剂、指示剂等和制药工艺中常用化学品如尿素、Tris、葡聚糖等。 西美杰是PanReac AppliChem的中国区总代理,为用户提供完善的技术支持与售后服务。如对以上产品感兴趣欢迎拨打西美杰客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多信息。 参考文献: Salazar A, Keusgen M , Hagen J V . Amino acids in the cultivation of mammalian cells[J]. Amino Acids, 2016, 48(5). Ritacco F V , Wu Y , Khetan A. Cell culture media for recombinant protein expression in Chinese hamster ovary (CHO) cells: History, key components, and optimization strategies[J]. Biotechnology Progress, 2018, 34(6). 更多>

辛酸钠 Sodium Caprylate ​ 1984-06-1

品名辛酸钠化学式C8H15NaO2分子量166.20 g/molpH8.0-10.5 (10%,水,25℃)CAS号1984-06-1[1]辛酸钠,是一种白色或类白色结晶性粉末,溶于水和冰醋酸,在乙醇中略溶,在丙酮中几乎不溶。[2]辛酸在生物医药制品中,辛酸钠被用作稳定剂,美国食品和药物管理局(FDA)发表文章,推荐将辛酸盐作为生物制品的稳定剂,终浓度为0.08±0.016 mM /g protein。[3]PanReac Applichem为用户提供不同级别的辛酸钠,包含药典级、以及低内毒素的药用辅料,适用于诊断试剂研发、生物制药等各种应用场景,满足广大客户的需求。以下是PanReac Applichem生产的各个级别的辛酸钠: 货号 品名 级别 A8959 Sodium caprylate (Ph. Eur.) pure, pharma grade 药典级 636454 Sodium Caprylate (USP-NF, BP, Ph. Eur., ChP) low endotoxin, IPEC grade 药典级,IPEC 北京西美杰科技有限公司作为Applichem中国区总代理,始终秉承着专业、严谨的态度为广大生命科学领域科研与企业客户提供高品质产品与优质服务。欢迎随时拨打西美杰全国客服热线400-050-4006或登录西美杰官方网站www.xmjsci.com查询订购! [4] [1] https://www.itwreagents.com/download_file/tds/A8959/en/tds_A8959_en.pdf [2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:四部[M]. 北京:中国医药科技出版社,2020. [3] Federal Register, 65. FR167; 28.08.2000. [4] National Center for Biotechnology Information. PubChem Compound Summary for CID 23664772, Sodium octanoate. https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Sodium-octanoate. Accessed Sept. 11, 2023. 更多>

KPL特色物种二抗:抗鸭、抗鹿、抗猪、抗马、抗白足鼠

二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。西美杰代理的LGC·Seracare·KPL目前能提供500多种二抗,覆盖10多个物种, 10多种标记。制备抗体的抗原、免疫动物都是经过严格筛选,得到的抗体经过盐沉淀、抗原吸附亲和纯化、多物种血清吸附处理,经过多重检测,冻干粉制备,具有高纯度、高灵敏度、特异性强、批次非常稳定等特点,并有不同亚型抗体如IgA (α)、IgE (ε)、IgG (γ)、IgM (μ)、IgG (H+L)、IgG (Fc)、F(ab’)2 Fragments满足不同检测需求。 LGC·Seracare·KPL二抗主要种属有:人、兔、大鼠、小鼠、山羊、绵羊、牛、猴、狗、猫、鸡、豚鼠、仓鼠等,其中比较特殊物种二抗有:鸭、鹿、白足鼠、马、猪,是本篇文章介绍的重点。LGC·Seracare·KPL为您提供特色抗鸭二抗: 货号 品名 规格 5230-0326 FITC标记山羊抗鸭IGG (H+L)二抗 0.5mg 5220-0296 HRP标记山羊抗鸭IGG (H+L)二抗 0.1mg 5210-0206 山羊抗鸭IGG (H+L)二抗 1.0mg LGC·Seracare·KPL为您提供特色抗鹿二抗: 货号 品名 规格 5230-0329 FITC标记山羊抗鹿IGG (H+L)二抗 0.5mg 5220-0298 HRP标记山羊抗鹿IGG (H+L)二抗 0.1mg 5210-0209 兔抗鹿IGG (H+L)二抗 1.0mg LGC·Seracare·KPL为您提供特色抗猪二抗: 货号 品名 规格 5230-0384 Dylight488标记山羊抗猪IGG (H+L)二抗 1.0mg 5230-0297 FITC标记山羊抗猪IGG (H+L)二抗 0.5mg 5220-0385 AP标记山羊抗猪IGG (H+L)二抗 0.5mg 5220-0363 HRP标记山羊抗猪IGG (H+L)二抗 0.5mg 5210-0173 山羊抗猪IGG (H+L)二抗 1.0mg LGC·Seracare·KPL为您提供特色抗马二抗: 货号 品名 规格 5260-0056 生物素标记山羊抗马IGG (H+L)二抗 0.5mg 5230-0320 FITC标记山羊抗马IGG (H+L)二抗 0.5mg 5220-0380 AP标记山羊抗马IGG (H+L)二抗 0.5mg 5220-0370 HRP标记山羊抗马IGG (H+L)二抗 0.5mg 5210-0201 山羊抗马IGG (H+L)二抗 1.0mg LGC·Seracare·KPL为您提供特色抗白足鼠二抗: 货号 品名 规格 5220-0382 AP标记山羊抗白足鼠IGG (H+L)二抗 0.5mg 5220-0375 HRP标记山羊抗白足鼠IGG (H+L)二抗 0.5mg 5210-0210 山羊抗白足鼠IGG (H+L)二抗 1.0mg 西美杰代理的LGC·Seracare·KPL是世界上知名的二抗和底物显色系统生产商,也是世界上早期实现亲和纯化二抗商业化的生物公司。 LGC·Seracare·KPL拥有近 40 多年的产品研发经验, 通过ISO 9001 质量体系认证,所有产品具有质量批间差小,品质可靠,高纯度、高灵敏度、高信噪比 (信号强、背景低)等特点,深受广大诊断企业好评。 北京西美杰作为LGC·Seracare·KPL的中国区总代理,致力于KPL优秀产品的中国推广,为国内的广大科研工作者提供优质的产品和专业的服务。若对产品感兴趣欢迎致电西美杰全国客服热线400-050-4006或者登陆官方网站:www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>

新品上市 | RevIT™ AAV Enhancer, 提高AAV产量的又一利器!

在病毒生产工艺方面,除了需要克服细胞递转过程中的多重阻碍,以实现更高效转染和更低细胞毒性;增强子的加入,还可大幅度提升多种血清型AAV病毒生产载量。但Mirus并没有止步于此,为了进一步提高下游生产中的AAV产量, 今年七月底西美杰代理的Mirus发布用于AAV生产的RevIT™ AAV Enhancer,可搭配Mirus TransIT-VirusGEN® GMP 转染试剂或其他品牌转染试剂 (如PEI等)。基于HEK293悬浮细胞数据,相对于老版本AAV增强子,RevIT™ AAV Enhancer可将AAV基因组滴度提高1.2-4.9倍,并且使用更便捷,非常容易整合入现有的AAV生产工艺流程中。Mirus RevIT™ AAV Enhancer的推出,使得AAV上游生产成本进一步降低成为可能,进而降低基因治疗药物单剂量成本。 更多>

Exalpha Biologicals|BrdU细胞增殖活性检测试剂盒

一 细胞增殖检测的意义 细胞增殖是生物体的重要生命特征,是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。监测细胞群的生长对细胞的状态研究很有必要。科研工作者们经常需要检测细胞增殖情况,比如验证抗肿瘤药物的药效时,监测细胞增殖及存活情况;研究肿瘤侵袭与转移模型时,分析细胞转移或侵袭的路径;分析创伤的修复或组织的重建时,检测细胞生长情况等等。检测细胞增殖及活性变化则可以很好的反映细胞的生长状况。 二 细胞增殖的研究方法 细胞增殖的研究方法有很多种,根据检测原理不同,主要分为DNA合成检测法、代谢活性检测法、细胞增殖标志物检测法等。本文重点介绍DNA合成检测之Brdu检测法,传统DNA合成检测方法使用胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入DNA,然后通过放射自显影或闪烁计数对DNA进行定量,该方法由于存在放射性物质、实验周期长、操作繁琐,且需要昂贵的设备,目前已被BrdU(5-Bromo-2-deoxyuridine,5-溴脱氧尿嘧啶核苷)检测方法取代,BrdU作为一种胸苷类似物,可选择性地掺入增殖细胞的DNA中,而且可稳定存在,并带到子代细胞中,细胞经过固定和变性处理后,可用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量,从而判断细胞的增殖能力。BrdU分子结构 小编整理汇总了常见细胞增殖检测方法,详见下表。 细胞增殖检测方法汇总 方法分类 检测方法 检测原理 DNA合成检测 Brdu检测法 BrdU是胸腺嘧啶核苷的类似物,能够在细胞增殖时期代替胸苷掺入增殖细胞的DNA中,而后利用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量,从而判断细胞增殖能力 DNA合成检测 胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法 用同位素3H标记TdR作为DNA合成前体掺入DNA合成代谢过程,通过测定放射性强度,反应细胞DNA代谢及增殖情况 代谢活性检测 MTT比色法 在活细胞生长和增殖过程中,线粒体内的脱氢酶可将黄色的MTT分解成蓝紫色的Formazan结晶,再利用酶标仪测定,以反映出活细胞数目,间接反应细胞增殖情况 细胞增殖标志物检测 Ki67,PCNA,MCM-2等相关抗原检测 通过观察增殖细胞中表达但非增殖细胞中不存在的特定蛋白质,来反映细增殖情况 荧光染料检测 羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)检测法 CFSE是一种荧光染料,脂溶性高,进入细胞,可以与胞内氨基酸发生不可逆的结合,在细胞的分裂过程中能进入子代细胞,同时荧光强度减半,再用流式细胞仪或荧光显微镜进行分析 实时动态电极阻抗检测 RTCA实时无标记细胞分析技术 将微电极列阵整合在细胞培养板孔底部,构建实时、动态、定量跟踪细胞形态和增殖分化改变的细胞阻抗检测传感系统。当微电极表面的细胞引起贴壁电极界面阻抗的改变时,这种改变与细胞的实时功能状态改变呈相关性 三 Exalpha Biologicals品牌BrdU检测试剂盒 因组织细胞内无内源性BrdU存在,可利用BrdU相关抗体来检测和定位掺入活跃增殖细胞新合成DNA的BrdU,Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒的优势在于使用细胞层作为固相,将BrdU试剂掺入微孔板中的细胞,除了对细胞增殖情况进行评估外,还可以从单个培养物中分析细胞数量、形态和细胞抗原等信息。同时Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒可通过试剂盒自带的固定/变性溶液一步完成细胞固定、透化和DNA变性等实验流程,大大缩短了实验时间。Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒中包含检测细胞增殖活性所需的所有组分、操作简便、无放射性、广泛的样本适用性,已得到众多科研工作者的青睐。 四 Exalpha Biologicals品牌BrdU检测试剂盒优势 简便:提供预稀释的滴管瓶,现用现配 安全:无放射性成分 完整:包含缓冲液、酶、阳性对照玻片和染色参考玻片 灵活:可用于任何物种组织样本 灵敏:极低的背景干扰 经济:成本低,高通量,多种规格 经BrdU处理的小鼠小肠免疫组织化学染色图 其他西美杰热卖BrdU相关产品列表 品牌 货号 产品类型 产品名称 应用 Exalpha X1327K1 试剂试剂盒 BrdU Cell Proliferation Assay Kit ELISA Exalpha X1623K1 试剂试剂盒 BrdU Chemiluminescent Cell Proliferation Assay Kit ELISA Exalpha X1545K 免疫组化试剂盒 BrdU Immunohistochemistry Kit ICC IHC (frozen & paraffin) Cell Biolabs CBA-251 试剂试剂盒 CytoSelect™ BrdU Cell Proliferation ELISA Kit ELISA Exalpha X1028 BrdU单抗 Mouse anti BrdU (bromodeoxyuridine) FC、IHC Exalpha MUB0200P BrdU抗体 Mouse anti Bromodeoxyuridine / BrdU FC、ICC、IHC(frozen & paraffin) Exalpha A205P BrdU多抗 Sheep anti BrdU (bromodeoxyuridine) FC、IHC(frozen & paraffin)、IP、WB Exalpha X1543M BrdU单抗 FITC标记 Mouse anti BrdU (bromodeoxyuridine), conjugated with FITC FC、IHC Agrisera AS16 3995 BrdU多抗 Bromodeoxyuridine IHC、IP、WB Agrisera AS16 3998 BrdU单抗 Bromodeoxyuridine (monoclonal, clone MoBU) determined by the investigator Exalpha X2834 BrdU试剂 Bromodeoxyuridine (BrdU) IHC 西美杰代理的Exalpha Biologicals成立于1998年,是一家位于美国波士顿的生命科学公司,专门提供尖端抗体、试剂、试剂盒和定制IgY服务等。2016年5月Exalpha Biologicals与Nordic-MUbio达成长期销售协议,Exalpha Biologicals产品可通过Nordic-MUbio直接销售给世界各地的客户。Nordic-MUbio是一家总部位于荷兰发展迅猛的抗体试剂公司,Nordic-MUbio提供单克隆抗体、生物标志物、即用型流式细胞术抗体等产品组合。2022年4月Absolute Biotech将包括Absolute antibody、LSBio、Kerafast、Exalpha、Nordic-MUbio和Everest在内多个生命科学品牌联合成一个新公司,为世界各地的科研人员提供独特抗体、细胞系、其他试剂及产品定制服务。欲了解更多产品信息,请访问http://www.absolutebiotech.com。 北京西美杰科技有限公司是Absolute Biotech中国区代理,Exalpha Biologicals代理为用户提供完善的技术和售后服务。如您对上述产品感兴趣,欢迎拨打全国客服热线400-050-4006或登录官网www.xmjsci.com查询和了解。 参考文献 Nakamura, S., et al. Application of bromodeoxyuridine (BrdU) and anti-BrdU monoclonal antibody for the in vivo analysis of proliferative characteristics of human leukemia cells in bone marrows. Oncology 1991, 48, 285-289 Wilson, G., Cell kinetic studies using a monoclonal antibody to bromodeoxyuridine. Methods Mol. Biol. 1998, 80, 255-266 Gray, J. (Ed), Special Issue: Monoclonal antibodies against bromodeoxyuridine Cytometry 1985, Vol. 6(6) Gutschalk, C.M., et al. ‘Granulocyte Colony-Stimulating Factor and Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Promote Malignant Growth of Cells from Head and Neck Squamous Cell Carcinomas In vivo.’ Cancer Res., 66, 8026-8036 (2006). Gray, J. (Ed), Special Issue: Monoclonal antibodies against bromodeoxyuridine Cytometry 1985, Vol. 6(6) Hawker JR Jr., 'Chemiluminescence-based BrdU ELISA to measure DNA synthesis.' J Immunol Methods. 2003 Mar 1;274(1-2):77-82. Ang, L.P.K., et al. 'Development of a conjunctival epithelial equivalent with improved proliferative properties using a multistep serum-free culture system.' Investigative Ophthalmology & Visual Science, 2004, 45, 1789-1795 Dual inhibition of IGF-IR and ALK as an effective strategy to eradicate NPM-ALK+ T-cell lymphoma Bhawana George, Suraj Konnath George, Wenyu Shi, Abedul Haque, Ping Shi, Ghazaleh Eskandari, Magnus Axelson, Olle Larsson, Ahmed O. Kaseb & Hesham M. Amin. Journal of Hematology & Oncologyvolume 12, Article number: 80 (2019). ISSN: 1756-8722 Wen-Ning Zhao, Norma K. Hylton, Jennifer Wang, Peter S. Chindavong, Begum Alural, Iren Kurtser, Aravind Subramanian, Ralph Mazitschek, Roy H. Perlis, Stephen J. Haggarty. Activation of WNT and CREB Signaling Pathways in Human Neuronal Cells in Response to the Omega-3 Fatty Acid Docosahexaenoic Acid (DHA). Mol Cell Neurosci. 2019 Sep; 99: 103386. Eleni Venetsanakos, Ken A. Brameld, Vernon T. Phan, Erik Verner, Timothy D. Owens, Yan Xing, Danny Tam, Jacob LaStant, Kwan Leung, Dane E. Karr, Ronald J. Hill, Mary E. Gerritsen, David M. Goldstein, Jens Oliver Funk, and J. Michael Bradshaw. The Irreversible Covalent Fibroblast Growth Factor Receptor Inhibitor PRN1371 Exhibits Sustained Inhibition of FGFR after Drug Clearance Mol Cancer Ther. 2017, 16(12); 2668–76. Nakamura, S., et al. Application of bromodeoxyuridine (BrdU) and anti-BrdU monoclonal antibody for the in vivo analysis of proliferative characteristics of human leukemia cells in bone marrows. Oncology 1991, 48, 285-289 Wilson, G., Cell kinetic studies using a monoclonal antibody to bromodeoxyuridine. Methods Mol. Biol. 1998, 80, 255-266 Gray, J. (Ed), Special Issue: Monoclonal antibodies against bromodeoxyuridine Cytometry 1985, Vol. 6(6) Gutschalk, C.M., et al. ‘Granulocyte Colony-Stimulating Factor and Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Promote Malignant Growth of Cells from Head and Neck Squamous Cell Carcinomas In vivo.’ Cancer Res., 66, 8026-8036 (2006). Gray, J. (Ed), Special Issue: Monoclonal antibodies against bromodeoxyuridine Cytometry 1985, Vol. 6(6) 更多>

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重组基因表达、RNA干扰、基因编辑等研究应用都离不开核酸的转染,目前,能有效将核酸转染到哺乳动物或昆虫细胞的方法主要有三种,分别是化学转染、病毒转导和电穿孔,这三种方法各有特色(详见下表)。其中,电穿孔方法是唯一满足既高效快速且适用各种难转细胞的转染方法,该方法既不受细胞类型的制约(如原代细胞研究),也没有对基因有效荷载大小的限制,唯一缺点大概就是仪器成本普遍较高。那么问题来了,有没有既便宜又好用的电穿孔设备呢?答案是:当然有! 化学转染 病毒转导 电穿孔 使用材料 化学试剂,如TransIT系列转染试剂,磷酸钙、脂质体、聚合物等 病毒载体生产或包装细胞系 电穿孔仪、电转杯和电转缓冲液 作用机理 化学转染试剂与核酸形成复合物,然后与细胞表面电荷相互作用,经内吞进入细胞 利用病毒载体,通过病毒感染将核酸导入细胞内 通过外加电场增加细胞膜的通透性 操作流程 在细胞中加入转染试剂与核酸的复合物 先转染细胞生产病毒载体,收获和纯化载体后再感染靶细胞 将细胞悬浮在缓冲液中并施加电脉冲 操作时间 很短 数天 很短 主要成本 化学试剂 时间,化学试剂 电穿孔设备 主要优势 方便 转染效率高,同时满足体外和体内转导,包括休眠细胞 适用于难转染的细胞 西美杰代理的Mirus品牌推出的Ingenio® EZporator® Electroporation System就是这么一款专为研究人员开发的简单高效且性价比超高的电穿孔系统,适用于多种哺乳动物细胞和昆虫细胞的转染,满足基因表达、RNA干扰、稳定细胞系构建以及CRISPR/Cas基因编辑等应用,为研究者提供了一种成本低且收益高的电转染解决方案。Ingenio® EZporator® Electroporation System Ingenio® EZporator®电转仪配套有专属电转染试剂盒Ingenio® Electroporation Kits,同样是超高性价比之选。该试剂盒内含电转缓冲液与电转杯等耗材,能在充分发挥Ingenio® EZporator®电转仪效率的基础上更好的保护细胞活性,此外,Ingenio®电转试剂盒还是一套开源系统,不仅适配Mirus的Ingenio® EZporator®电转仪,还适用于市面上常见的Lonza-Amaxa®,Bio-Rad®以及Harvard BTX®等品牌的电转仪,给已经拥有电转仪的客户提供了另一种高性价比选择。Ingenio® Electroporation Kits 与市面上充斥的各种繁琐复杂的仪器相比,Ingenio® EZporator®电转仪简直是一股清流,不仅外观设计简洁,就连操作也延续了一贯的极简风格。不仅如此,Mirus的研发团队还针对不同的细胞系进行了电转条件优化,提供了一套非常详细的电转染条件参考,使用者可以直接抄作业,不需要进行复杂的电转染条件摸索,非常贴心! Ingenio® EZporator®电转仪操作步骤 1. 将机器各部件连接好,在电转杯中加入适当细胞与电转缓冲液(参照操作手册)。 2. 开机确认面板在“READY”状态,用电压调节旋钮调节到适当电压和模式(哺乳动物细胞用低压LV模式,设置电压条件参照操作手册),将电转杯放入电转槽内并盖好安全盖。 3. 按下Pulse按钮,机器开始充电并发出电转脉冲,此时会听到电脉冲发出的声音。 4. 记录峰值电压(Vp)和时间常数(t)。 5. 取出细胞进行正常培养和后续实验。 6. 电转程序结束后,按Pulse按钮或者旋转电压调节钮即可返回“READY”状态,然后重复上述步骤进行其他样品的电转操作。 不同细胞电转染参数推荐 Ingenio® EZporator®电转仪实验数据 Jurkat E6-1 (A)、K562 (B)、Raji (C)和Raw 264.7 (D)细胞在不同电压条件下使用Ingenio®电转缓冲液和Ingenio®EZporator®电转仪,分别用0.2cm和0.4cm电转杯和EGFP报告基因观察电转效率。电穿孔后48h,用流式细胞术测定GFP阳性细胞百分比(柱状图)和细胞活率(点线图)。 Ingenio®优势特点功能:能将任何核酸分子转染到各种类型的细胞中,包括难转染细胞系、干细胞、原代细胞等。 简单:仪器操作流程简单,仅需一款缓冲液即可通用所有类型细胞的电转染。 灵活:提供不同类型的细胞电穿孔参数参考,让电转染条件优化更加简单。 产品详情 品名 货号 规格 Ingenio® EZporator®电转仪 Ingenio® EZporator® Electroporation System MIR 51000 包含主机1个,电转杯槽1个,电源线3根 Ingenio®电转染试剂耗材 Ingenio® Electroporation Kits (0.4 cm cuvettes and cell droppers) 电转染试剂盒(含0.4cm电转杯与缓冲液)热销款 MIR 50113 25 reactions MIR 50116 50 reactions MIR 50119 100 reactions Ingenio® Electroporation Kits (0.2 cm cuvettes and cell droppers) 电转染试剂盒(含0.2cm电转杯与缓冲液) MIR 50112 25 reactions MIR 50115 50 reactions MIR 50118 100 reactions Ingenio® Electroporation Solution 电转染缓冲液(多平台通用) MIR 50111 25 reactions MIR 50114 50 reactions MIR 50117 100 reactions Ingenio® Cuvettes(0.4cm电转杯) MIR 50123 50 pk, 0.4 cm cuvettes Ingenio® Cuvettes(0.2cm电转杯) MIR 50121 50 pk, 0.2 cm cuvettes 如果您正在考虑配置一台高性价比的电转染系统,不妨选择Ingenio® EZporator®电转仪试试吧!关注西美杰微信公众号(微信号xmjsci),回复关键词“电转仪”,填写表单即可申请样机测试。样机随赠8次规格电转染试剂耗材,方便您快速开启电转染测试! 美国Mirus公司成立于1995年,是世界上很早开发高效、低毒转染试剂的公司,同时也是该类试剂的主要供应商之一。其产品线涵盖化学转染试剂、电转染产品、病毒生产和转导产品,适用于基因功能研究、蛋白生产、病毒载体生产和动物模型构建等领域。Mirus被公认为转染试剂开发的领跑者,其许多杰出成果获得世界公认与广大用户的好评。北京西美杰科技有限公司是Mirus中国区代理,始终秉承着专业、严谨的态度为客户提供优质的产品与服务,Mirus热销转染产品常备现货。如果您对上述产品感兴趣,欢迎致电北京西美杰客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多产品信息。 更多>

如何选择合适的植物凝胶?

植物凝胶是植物组织培养过程中用来凝固培养基的物质,其自身一般不具有营养,作为固体支持物存在,一般在选用时考虑三个方面:1、使用方便;2、对培养植物不产生不利影响,不与培养基中其他组分例如抗生素发生反应;3、具有较好的透明度。 目前比较常用的植物凝胶主要包括:琼脂(Agar)、结冷胶(Gellan Gum)、卡拉胶(Carrageenan)等。琼脂是一种天然产物,主要来自红藻科的两个属:石花菜属(Gellidium)和江篱属(Gracillaria)。石花菜属本身小且生长缓慢,很难获得,不经济,但其来源的琼脂比江篱属来源的具有更高的凝胶强度。由于琼脂来自天然藻类,所以产品品质容易受到原材料由于生长环境变化导致的影响,最终产生批间差异。不过西美杰代理的Phytotech Labs做为具有20多年生产经验的植物组培产品供应商,在每批琼脂出厂时,会进行清晰度、凝胶强度、植物生物生长以及产品其他理化性质的评估,以确保产品的稳定性。卡拉胶同样来源于藻类,但比琼脂有更好的透明度。结冷胶是新型的凝胶,来源于微生物发酵产物,批间差更加稳定,而且具有用量小,透明度更高的有点。 西美杰代理的专业植物培养基品牌Phytotech Labs,可以为广大植物客户提供以下不同型号的植物凝胶: A111 琼脂(江蓠来源) ~1150g/cm2 6-10g/L 通用型琼脂,价格更优惠 A296 琼脂(石花菜来源) ~900 g/cm2 6-10g/L 普通植物研究,微生物研究;石花菜生长缓慢很难获得,不经济,所以价格较A111高 A175 高纯度琼脂 ~1100 g/cm2 6-10g/L 用于胚胎发生等关键研究的高纯度琼脂;可替代A111,但比A111更纯净 A133 琼脂结冷胶混合物 TBD 3.5-5 g/L 用于工业化放大培养 C257 卡拉胶 TBD 6-10g/L 用于原生质体培养 C2000 卡拉胶(高透明度) >800 g/cm2 6-10g/L 用于原生质体培养 G434 结冷胶 >800 g/cm2 2-4 g/L 高透明度 G3251 结冷胶 400-700 g/cm2 2-4 g/L G434升级款 使用注意事项: l G434与氨基酸糖苷类抗生素(特别是卡那霉素和潮霉素B)一起使用对植物生长有影响。如遇此类情况,建议降低抗生素的使用浓度。 l 结冷胶的溶解要求比较特殊,一是温度,结冷胶不溶于冷水,一定要是加入热水搅拌溶解;二是培养基中二价阳离子浓度是结冷胶凝固的关键,一般是Mg2+,和Ca2+这2种离子的总浓度在4-10mM适中,而且2种离子的浓度最好都不要低于1.5mM,低于或者过高都会影响凝胶效果,一般来说MS培养基中二价离子浓度是足够的,1/2MS培养基用结冷胶也可以凝固的很好,目前确定不适合用结冷胶的培养基有DKW,SH,LS。三是pH值,结冷胶凝固最适合pH值为5.8,一般高温灭菌影响不大,但不排除因为高压条件变化导致pH值变化影响的凝胶效果。 l 植物凝胶尤其是琼脂不凝固是与pH值有关系,pH过低导致的。出现此类情况是因为调节pH值的操作问题,很多客户都先调节了pH值,然后再加入了植物凝胶,这个过程中pH值可能会降低到5.2,才会不凝固。解决办法:加入琼脂粉后调节pH值。 西美杰代理的PhytoTech LABs是美国知名的植物培养基供应商,公司从1997年成立不断发展壮大,其优质植物基础培养基、植物凝胶、植物生长调节剂、抗生素享有盛名,成为全球植物科研工作者的主选品牌。PhytoTech LABs产品涵盖广泛、批次差异小、方便保存、性价比高、品质可靠,满足多样化的实验需求,节省组培实验所需大量人力和时间,提高植物组培环节的效率。PhytoTech LABs通过ISO 9001:2000质量体系认证,所有产品按照cGMP标准生产和包装,生产过程受到严格质量控制,每个产品的物理学、化学、生物学特性都经过了严格检测,并经过组织培养检测。 更多>

新药研发重要靶点--G蛋白偶联受体

G蛋白偶联受体(G Protein-Coupled Receptors,GPCRs)也称7TM受体,是最大和最重要的一类整合膜蛋白家族的统称。其由一条肽链形成并含有七次跨膜形成的疏水跨膜区段,其N-末端位于膜外,C-末端位于膜内。目前为止,研究显示G蛋白偶联受体只见于真核生物之中,而且参与了很多细胞信号转导过程。在这些过程中,G蛋白偶联受体能结合细胞周围环境中的化学物质并激活细胞内的一系列信号通路,最终引起细胞状态的改变。已知的与G蛋白偶联受体结合的配体包括气味,费洛蒙,激素,神经递质,趋化因子等等。这些受体可以是小分子的糖类,脂质,多肽,也可以是蛋白质等生物大分子。一些特殊的G蛋白偶联受体也可以被非化学性的刺激源激活,例如在感光细胞中的视紫红质可以被光所激活。与G蛋白偶联受体相关的疾病为数众多,目前以GPCRs为靶点的药物几乎占市售药物的40%以上。 G蛋白偶联受体可以被划分为六个类型,分别是:A类视紫红质样受体(Rhodopsin-like receptors),B类分泌素受体家族(Secretin receptor family),C 类代谢型谷氨酸受体/信息素,D类真菌交配信息素受体(Fungal mating pheromone receptors),E类环腺苷酸受体(Cyclic AMP receptors),F类卷曲受体。GPCRs 的胞外区域在结合激动性信号分子(如气味、激素、神经递质、趋化因子)后发生构象变化,进而引发跨膜螺旋的运动,特别是第6跨膜螺旋靠近胞内的那部分(intracellular half of TM6)往外翘起。此时激活受体的胞内区域可招募并结合下游效应蛋白(如G蛋白、P-arrestin等)。G蛋白α,β,γ三种亚基组成的三聚体,静息状态时与GDP结合.当受体激活时GDP-αβγ复合物在Mg2+参与下,结合的GDP与胞质中GTP交换,GTP-α与βγ分离并激活效应器蛋白,同时配体与受体分离。α亚基本身具有GTP酶活性,促使GTP水解为GDP,在与βγ亚基形成G蛋白三聚体恢复原来的静息状态。有三种主要的G蛋白介导的信号通路,由四种通过序列的同源性差异区别开来的G蛋白亚类(Gαs、Gαi/o、Gαq/11和Gα12/13)介导。Gαs和Gαi/o径的作用对象是环腺苷酸(cAMP)的生成酶——腺苷酸环化酶(AC),细胞质内cAMP的水平进而可以决定各种离子通道以及丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白激酶A (PKA)家族成员的活性。cAMP被认为是第二信使,而PKA是第二效应因子。Gαq/11通路的效应因子是磷脂酶C-β (PLCβ),它催化膜结合的磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP2)裂解为肌醇1,4,5-三磷酸(IP3)和二酰基甘油(DAG)。IP3作用于内质网(ER)膜上的IP3受体,促使内质网释放Ca2+,而DAG沿质膜扩散,可激活丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白激酶C (PKC)结合在膜上的部分。由于PKC的许多异构体也被细胞内Ca2+的增加激活,这两种途径也可以相互作用,通过相同的二级效应体PKC发出信号。升高的细胞内Ca2+也可以结合和激活被称为钙调素的蛋白质,钙调素进而激活Rho GTP酶,。一旦与GTP结合,Rho可以继续激活和调节细胞骨架上的各种蛋白,如Rho激酶(ROCK)。这些效应蛋白通过上诉的环腺苷酸(cAMP)信号通路、磷脂酰肌醇信号通路和钙离子信号通路等调节体内生理活动。GPCRs的激活机制是理解其生理功能及相关疾病成因的必由之路,也是药物精准研发的基础,并一直是该领域研究的核心内容和前沿热点。GPCRs 基因表达的改变和信号转导的失调已被认为是恶性肿瘤的标志。细胞膜上特异性GPCRs 的异常表达可刺激细胞持续且不受调控地增殖并触发细胞内信号转导,最终导致肿瘤细胞的生长。 西美杰代理的专业免疫组化抗体生产商Lifespan为客户提供超过1000多种GPCRs相关抗体,且都经过了实验验证,小编列举部分热门抗体供大家参考(LS开头为对应产品货号): ADCYAP1R1 LS-A944 C3AR1 LS-A28 CNR1 LS-A32 GALR1 LS-A4105 HTR1D LS-A590 TAAR1 LS-A2042 ADORA1 LS-A10 C5AR1 LS-B5229 CRHR2 LS-A3570 GPR78 LS-A443 KISS1R LS-A1929 NMBR LS-A825 ADORA3 LS-A689 CALCR LS-A772 CXCR1 LS-A806 GPR173 LS-A516 LGR4 LS-A3593 NPFF2 LS-A463 ADGRG7 LS-A8008 CCKAR LS-A3293 DRD1 LS-A44 GALR3 LS-A205 LPHN2 LS-A1136 NPY1R LS-A1064 BAI2 LS-A981 CCR1 LS-A1242 EDNRA LS-A4073 GPRC5A LS-A1220 MAS1L LS-A187 O3FAR1 LS-A2003 BAI3 LS-A978 CELSR1 LS-A5575 ELTD1 LS-A2113 GRM1 LS-A882 MC1R LS-A1040 OR6K3 LS-A4355 BDKRB1 LS-A3580 CCR10 LS-A365 F2RL1 LS-B2321 GRPR LS-A831 MCHR1 LS-A1567 P2RY1 LS-A4355 BRS3 LS-A4916 CMKLR1 LS-B12924 FZD5 LS-A4273 HRH1 LS-B1745 MRGPRD LS-A4123 SSTR4 LS-A4148 LifeSpan Biosciences公司成立于1995年,是享誉全球的免疫组化抗体生产商。其主要产品线包括抗体、ELISA试剂盒以及蛋白等,目前拥有近10万种单克隆和多克隆抗体,这些抗体能够检测大约16300种不同的靶标,覆盖的检测物种丰富,适用多种实验类型,比如免疫印迹,免疫组化,免疫荧光和基于免疫荧光的细胞分选。Lifespan时刻关注前沿信息更新产品,产品质量优质,具有丰富的参考文献与实验验证数据,售后服务良好,能够高效的帮助生物制品企业客户缩短研发周期,提升检测水平。 更多>

星品推荐 | Applichem多级别Tris系列产品

Tris中文品名为三羟甲基氨基甲烷,是一种白色结晶或粉末,溶于水。[1] Tris是应用较普遍的缓冲液,用来维持反应体系的酸碱值,其有效调节范围是在7-9之间。与磷酸盐缓冲液相比,Tris缓冲液在含有钙、镁等金属离子的溶液中不会产生沉淀,因此被广泛应用于医药,生化,化妆品等领域。[2] Tris可以维持蛋白质的pH值,使蛋白质的结构不发生改变,可用于蛋白提取;也可用于体外诊断中,因为大多有酶的参与,而合适的pH才能使酶起到催化作用。Tris还可以用于蛋白质、核酸电泳实验,DNA琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳中使用的电泳缓冲液是Tris的缓冲体系,如TAE、TBE,TPE等缓冲液。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。[3] 品名 Tris,三(羟甲基)氨基甲烷 化学式 C4H11NO3 分子量 121.14 g/mol 溶解度 ~680g/L (水,20℃) 密度 1.32 g/cm3 (20℃) CAS号 77-86-1 PanReac AppliChem (简称AppliChem )是欧洲优质生物化学试剂与制药原料生产商之一,企业通过ISO 9001、ISO 14001、ISO 45001等质量体系认证,已成为全球科研、知名CRO企业、大型制药、诊断、食品、化妆品等工业的重要供应商,以及全球多家知名培养基生产企业和制药企业长期固定供应商。全面提供细胞培养级、符合各国药典等生物制药上下游系列生物化学试剂、cGMP生产的原辅料。PanReac Applichem为用户提供不同级别的Tris,包含药典级、分子生物学级、超纯级和分析纯级,适用于实验室、诊断试剂研发、生物制药等各种应用场景,满足广大客户的需求。以下是PanReac Applichem生产的各个级别的Tris:货号 品名 级别 Z41940 Tris (Hydroxymethyl) Aminomethane Pharma grade (USP, BP, Ph. Eur.) low endotoxin pure 141940 Tris Pharma grade (USP, BP, Ph. Eur.) pure A2264 Tris for molecular biology Molecular biology A1086 Tris ultrapure Ultrapure A1379 Tris for buffer solutions A4263 Tris buffer pH 7.5 (1 M) for molecular biology Molecular biology A4577 Tris buffer pH 8.0 (1 M) for molecular biology Molecular biology 241940 Tris standard for volumetry ACS 131940 Tris for analysis Analysis, ACS Applichem药典级Tris(货号141940)多个规格现货促销中,还有多款热销生物制品用生化试剂特价优惠,欢迎咨询订购! 北京西美杰科技有限公司作为Applichem中国区总代理,始终秉承着专业、严谨的态度为广大生命科学领域科研与企业客户提供高品质产品与优质服务。欢迎随时拨打西美杰全国客服热线400-050-4006或登录西美杰官方网站www.xmjsci.com查询订购! [1] https://www.itwreagents.com/download_file/sds/Z41940/cn/sds_Z41940_zh-cn.pdf [2] https://www.itwreagents.com/rest-of-world/en/product/tris-usp-bp-ph-eur-pure-pharma-grade/141940 [3] Irena Dapic, et al., Mass Spectrometry Reviews, 2019, 00, 1–39 更多>

新品上市 | PG13细胞宿主蛋白残留检测试剂盒

PG13细胞系用于生产高滴度的逆转录病毒,这种病毒能够通过感染人类细胞进行基因治疗和细胞治疗。在逆转录病毒生产和纯化过程中可能存在PG13细胞衍生、残留的宿主细胞蛋白(HCP)杂质,为了确保产品中的HCP残留含量达到要求,因此需要监控和检测HCP杂质的浓度和含量。Cygnus开发出一款专门检测PG13细胞产生的HCP残留的试剂盒,该试剂盒简单易用,采用半定量的酶联免疫吸附法 (ELISA),所使用的抗体是针对PG13细胞产生的,经过抗体亲和提取(AAE)以及质谱的鉴定,能与几乎所有可能污染产品的HCPs发生反应。该试剂盒可应用于优化纯化工艺开发、工艺控制、常规质量控制和产品放行等方面的HCP检测。产品信息 产品名称:PG13 Host Cell Protein ELISA Kit 货号:F995 检测方法:酶联免疫吸附法 (ELISA) LOD:~0.4 ng/mL LLOQ:~3 ng/mL 检测时间:~2小时50分钟 保存温度:2°C to 8°C 推荐样品稀释液:I028 Cygnus Technologies, LLC.为生物技术和生物制药行业提供可靠的产品和分析方法,旨在加速研发阶段和提高产品质量。Cygnus开发和生产的生物工艺残留试剂盒,用于检测超过50种不同表达系统的特异性杂质。Cygnus作为专注于生物技术应用免疫检测的高灵敏度分析技术的专家,其产品和服务已经被几乎所有主要的生物制药公司使用超过25年。北京西美杰科技有限公司作为Cygnus在中国总代理,与国内众多知名药企,CRO/CMO企业建立了长久稳定的合作关系。多年来西美杰的产品及服务帮助许多企业加速R&D阶段,提高药物质量、纯度和安全,加速优化研发工艺,减少产品上市时间,降低QC成本。如您对上述产品感兴趣,欢迎致电西美杰客服热线400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>

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北京西美杰科技有限公司(Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd,以下简称西美杰)于2006年成立,由留美归国生物领域专业人士创办。西美杰坚持自己的经营理念,勤奋踏实地整合全球产品资源与技术资源,为高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生产企业提供一站式产品服务方案,帮助科研及企业单位缩短科研时间... 更多>

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