昆虫细胞表达系统是生物制药与基础研究中广泛应用的真核蛋白表达平台，适用于需简单翻译后修饰（如有限糖基化、磷酸化或蛋白水解）但无需哺乳动物特异性修饰的重组蛋白。其兼具真核加工能力与操作优势：相比原核系统，具备内质网和高尔基体，支持蛋白正确折叠、二硫键形成及部分寡糖添加；相比哺乳动物细胞（如CHO、HEK293），细胞培养成本更低、生长更快、耐剪切与低氧，更适于中试放大与早期功能验证。使用昆虫细胞表达蛋白的主流技术为瞬时转染（3–5天获毫克级蛋白，适合条件筛选与抗原制备）和杆状病毒表达系统（BEVS），后者通过重组病毒实现高效、可控表达，适用于酶、病毒样颗粒（VLPs）、结构生物学样品及疫苗抗原等需高产稳定的应用。

然而，昆虫细胞虽然是真核细胞，但其生物学特性与常见哺乳动物细胞系存在显著差异。昆虫为变温动物，其最适培养温度为25℃，而哺乳动物细胞则需37℃。大多数昆虫细胞系可贴壁或悬浮培养，适用于含血清或无血清培养基。此外，昆虫细胞对脊椎动物病毒不易感（如腺病毒或慢病毒），而是拥有自身特有的病毒群（如杆状病毒）。我们常用的转染试剂通常是针对哺乳动物细胞开发的，如果直接应用于昆虫细胞转染通常无法达到理想效果，为了解决这一难题，Mirus Bio开发了一款专为昆虫细胞独特生物学特征而设计的转染试剂——TransIT®-Insect。

TransIT®-Insect转染试剂是一种不含动物源成分的非病毒型基因递送试剂，专为多种常用昆虫细胞系（包括Sf9、High Five™、S2等）的生理特性与膜结构特点而开发。该试剂采用Mirus Bio专有的lipid+polymer复合配方，可在不依赖脂质体结构的前提下，与DNA形成稳定纳米复合物，并通过内吞途径高效进入细胞，从而显著提升转染效率。

TransIT-Insect针对昆虫细胞有很高的转染效率同时细胞毒性极低

使用TransIT®-Insect转染试剂在6孔板中对杆状病毒基因组DNA进行高效转染，每孔接种5×10⁵个Sf9昆虫细胞，TransIT®-Insect转染试剂与总DNA的质量体积比为3μL : 1μg。每孔共转染0.5 μg ProGreen™杆状病毒基因组载体DNA（含绿色荧光蛋白，GFP，AB Vector）及0.1 μg pVL1393辅助载体（AB Vector）。转染后第6天，用荧光显微镜观察GFP荧光，如上图所示，Sf9细胞转染效率＞80%，且均保持很高的细胞活率（A为单通道荧光与相差图像，B为二者叠加的融合图像）。

TransIT®-Insect在昆虫细胞的转染效率显著优于市场其他同类产品

分别用TransIT-Insect和两款其他品牌的转染试剂，以不同试剂与DNA的比例（微升：微克）将0.1 µg由hr5增强子/IE1启动子驱动的荧光素酶表达质粒转染至96孔板中的昆虫细胞系：Sf9、High Five™和S2细胞。Sf9和High Five™细胞在无血清培养基中培养并进行转染；S2细胞则在含血清培养基中进行。转染48小时后检测荧光素酶表达水平。如上图所示，TransIT-Insect转染试剂在不同转染条件以及三种昆虫细胞中的转染效率均显著优于另外两款其他品牌的转染试剂。

TransIT®-Insect在High Five™细胞实现重组蛋白的高效表达

使用TransIT-Insect和其他品牌的转染试剂，将含有hr5增强子/IE1启动子的GFP表达质粒（2.5 µg）按标准试剂比DNA比例（µL： µg）转染至6孔板中的High Five™细胞。转染后72小时收集细胞，制备总可溶性细胞裂解液。取100 µL培养物的裂解液经SDS-PAGE电泳并用考马斯亮蓝染色分析；未转染的细胞作为对照。如上图所示，在转染的细胞裂解液中清晰检测到含6X His、S和HSV标签的GFP蛋白（约38 kDa），并且在TransIT®-Insect转染组细胞中可观察到最高的蛋白表达水平（*）。

TransIT®-Insect转染试剂随时间推移可显著提高蛋白表达水平

使用TransIT®-Insect转染试剂（试剂与DNA比例为2:1，μL：μg），将0.1 μg由hr5增强子/IE1启动子的荧光素酶表达质粒分别转染至96孔板中的三种昆虫细胞系：Sf9、High Five™和S2细胞。在转染后24小时、48小时和72小时三个时间点检测荧光素酶表达水平。Sf9和High Five™细胞在无血清培养基中培养并进行转染；S2细胞则在含血清培养基中培养。结果如上图所示，荧光素酶表达水平呈现显著上升趋势，由此表明TransIT-Insect转染后随时间推移可显著提高蛋白表达水平。

以上数据表明，TransIT®-Insect转染试剂核心优势体现在以下四个方面：

• 优异的DNA转染效率——适用于Sf9、High Five™及S2等多种常用昆虫细胞系；

• 显著提升重组杆状病毒滴度——缩短病毒扩增周期，降低多轮传代导致的基因组不稳定性风险，进而保障后续感染批次间的一致性与可重复性；

• 兼容含血清培养体系——转染过程无需预先更换为无血清培养基，避免因换液引起的细胞应激与贴壁脱落，特别适用于悬浮培养的Sf9或High Five™细胞的大规模转染操作；

• 超高的性价比——单位转染反应所需试剂用量显著降低，且价格实惠。

TransIT®-Insect转染试剂凭借高效低毒、广泛适配性以及高性价比等特点，能很好地契合昆虫细胞杆状病毒包装与重组蛋白表达的研发及规模化生产需求，为昆虫细胞体系的基因递送提供稳定可靠、可重复的优选方案。

产品详情

文末福利

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Mirus Bio成立于1995年，始终秉承着为基因递转提供最佳方法及最高效的工具，是核酸递送领域的全球领导者和值得信赖的品牌。Mirus Bio转染试剂可支持1200余种细胞转染，已被上万篇文献引用。2021年推出TransIT®-VirusGEN转染试剂系列，补齐CGT病毒载体生产工业化方案，覆盖AAV、慢病毒生产；配套的GMP级转染试剂、病毒增强剂、转染复合物稳定剂，支持CAR-T、In Vivo CAR-T、CAR-NK等多种细胞基因疗法，覆盖科研筛选至商业化、小规模至放大阶段的生产全流程。

北京西美杰科技有限公司是Mirus Bio中国区代理，始终秉承着专业、严谨的态度为客户提供优质的产品与服务。如果您对上述产品感兴趣，欢迎致电北京西美杰客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多产品信息。