细胞增殖检测的意义
细胞增殖是生物体的重要生命特征,是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。监测细胞群的生长对细胞的状态研究很有必要。科研工作者们经常需要检测细胞增殖情况,常见的应用场景包括:
• 验证抗肿瘤药物药效时,监测细胞增殖及存活情况
• 研究肿瘤侵袭与转移模型时,分析细胞转移或侵袭路径
• 分析创伤修复或组织重建时,检测细胞生长情况
• 评估化合物、化妆品、医疗器械的细胞毒性
• 检测淋巴细胞受抗原/丝裂原刺激后的活化增殖

细胞增殖示意图
细胞增殖的研究方法
细胞增殖的研究方法有很多种,根据检测原理不同,主要分为DNA合成检测法、代谢活性检测法、细胞增殖标志物检测法等。传统DNA合成检测方法使用胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入DNA,然后通过放射自显影或闪烁计数对DNA进行定量,该方法由于存在放射性物质、实验周期长、操作繁琐,且需要昂贵的设备,目前已被BrdU(5-Bromo-2-deoxyuridine,5-溴脱氧尿嘧啶核苷)检测方法取代,BrdU(5-Bromo-2'-deoxyuridine,5-溴脱氧尿嘧啶核苷)是胸腺嘧啶核苷的类似物,结构上将胸腺嘧啶的甲基替换为溴原子。在细胞增殖的S期(DNA合成期),BrdU可以代替胸苷掺入新合成的DNA链中,并稳定存在于子代细胞中。细胞经过固定和DNA变性处理后,用抗BrdU抗体进行免疫学检测,定量测定掺入的BrdU量,即可准确反映细胞增殖能力。

BrdU分子结构
小编整理汇总了常见细胞增殖检测方法,详见下表。
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方法分类 |
检测方法 |
检测原理 |
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DNA合成检测 |
BrdU检测法 |
BrdU是胸腺嘧啶核苷类似物,在细胞增殖期代替胸苷掺入新合成DNA中,利用免疫学方法检测BrdU含量判断增殖能力 |
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DNA合成检测 |
³H-TdR渗入法 |
用同位素³H标记胸苷掺入DNA,通过闪烁计数测定放射性强度。有放射性、操作繁琐,已逐步被BrdU取代 |
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代谢活性检测 |
MTT / CCK-8比色法 |
活细胞线粒体内脱氢酶将黄色底物分解为有色结晶,酶标仪测定吸光度反映活细胞数目。间接反映增殖,测的是代谢活性 |
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增殖标志物检测 |
Ki-67 / PCNA / MCM-2 |
检测仅在增殖细胞中表达的特定蛋白。适合组织切片IHC,反映某一时间点的增殖状态 |
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荧光染料检测 |
CFSE检测法 |
CFSE荧光染料不可逆结合胞内蛋白,每次分裂荧光强度减半,流式或荧光显微镜分析。可追踪分裂代数 |
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实时动态检测 |
RTCA实时无标记 |
通过细胞培养板底部微电极阻抗变化实时监测细胞增殖。无需标记、可动态追踪,但仪器昂贵 |
选择建议:若需直接、准确测量DNA合成(即真正的细胞增殖),BrdU检测法是目前最主流方案——无放射性、操作简便、灵敏度高、适合高通量。CCK-8/MTT比色法虽更简单,但测的是活细胞代谢活性,严格来说不等于增殖(细胞静止但存活也会有信号)。
Exalpha Biologicals品牌BrdU检测试剂盒
因组织细胞内无内源性BrdU存在,可利用BrdU相关抗体来检测和定位掺入活跃增殖细胞新合成DNA的BrdU,Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒的优势在于使用细胞层作为固相,将BrdU试剂掺入微孔板中的细胞,除了对细胞增殖情况进行评估外,还可以从单个培养物中分析细胞数量、形态和细胞抗原等信息。同时Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒可通过试剂盒自带的固定/变性溶液一步完成细胞固定、透化和DNA变性等实验流程,大大缩短了实验时间。Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒中包含检测细胞增殖活性所需的所有组分、操作简便、无放射性、广泛的样本适用性,已得到众多科研工作者的青睐。
BrdU检测试剂盒优势
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简便 |
提供预稀释的滴管瓶,现用现配 |
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安全 |
替代³H-胸苷法,无放射性成分 |
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完整 |
包含缓冲液、酶、阳性对照玻片和染色参考玻片 |
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灵活 |
可用于任何物种组织样本 |
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灵敏 |
超低的背景干扰 |
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经济 |
成本低,高通量,多种规格 |
其它BrdU相关产品列表
ELISA细胞增殖检测试剂盒
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品牌 |
货号 |
产品名称 |
检测方法 |
应用 |
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Exalpha |
X1327K1 |
BrdU Cell Proliferation Assay Kit |
比色法 |
ELISA,96孔板高通量细胞增殖定量 |
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Exalpha |
X1623K1 |
BrdU Chemiluminescent Cell Proliferation Assay Kit |
化学发光法 |
ELISA,更高灵敏度细胞增殖定量 |
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Cell Biolabs |
CBA-251 |
CytoSelect™ BrdU Cell Proliferation ELISA Kit |
比色法 |
ELISA,细胞增殖定量 |
免疫组化(IHC)试剂盒
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品牌 |
货号 |
产品名称 |
应用 |
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Exalpha |
X1545K |
BrdU Immunohistochemistry Kit |
ICC、IHC(冰冻&石蜡切片) |
用于组织切片或细胞样本中BrdU的原位检测,可观察增殖细胞的定位和分布情况。
BrdU单克隆抗体
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品牌 |
货号 |
产品名称 |
标记 |
应用 |
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Exalpha |
Mouse anti-BrdU (bromodeoxyuridine) |
未标记 |
FC、IHC |
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Exalpha |
Mouse anti-Bromodeoxyuridine / BrdU |
未标记 |
FC、ICC、IHC(冰冻&石蜡) |
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Exalpha |
Mouse anti-BrdU, FITC conjugated |
FITC |
FC、IHC |
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Agrisera |
AS16 3998 |
BrdU monoclonal (clone MoBU) |
未标记 |
研究者自行确定 |
BrdU多克隆抗体
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品牌 |
货号 |
产品名称 |
应用 |
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Exalpha |
Sheep anti-BrdU (bromodeoxyuridine) |
FC、IHC(冰冻&石蜡)、IP、WB |
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Agrisera |
AS16 3995 |
Bromodeoxyuridine (BrdU) 多抗 |
IHC、IP、WB |
BrdU原料试剂
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品牌 |
货号 |
产品名称 |
应用 |
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Exalpha |
Bromodeoxyuridine (BrdU) |
IHC标记、自行配制标记培养基 |
品牌介绍
Exalpha Biologicals1998年成立于美国波士顿,专注抗体研发与ELISA试剂盒生产,20年+行业经验,专门提供尖端抗体、试剂、试剂盒和定制IgY服务等,ISO 9001质量体系认证,产品覆盖全球科研与IVD市场。2022年加入Absolute Biotech,与Absolute antibody、LSBio、Kerafast、Exalpha、Nordic-MUbio和Everest在内多个生命科学品牌组成抗体试剂集团。2024年5月,Vector Laboratories与Absolute Biotech完成合并,Exalpha正式归入Vector品牌旗下。Vector Laboratories是拥有近50年历史的免疫检测领域领导品牌,以生物素-亲和素系统(ABC Kit)和荧光封片剂闻名全球。欲了解更多产品信息,请访问https://www.exalpha.com/。
北京西美杰科技有限公司是Vector/Exalpha中国区代理,为用户提供完善的技术和售后服务。如您对上述产品感兴趣,欢迎拨打全国客服热线400-050-4006或登录官网www.xmjsci.com查询和了解。
参考文献
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3. Gray, J. (Ed), Special Issue: Monoclonal antibodies against bromodeoxyuridine Cytometry 1985, Vol. 6(6)
4. Gutschalk, C.M., et al. ‘Granulocyte Colony-Stimulating Factor and Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Promote Malignant Growth of Cells from Head and Neck Squamous Cell Carcinomas In vivo.’ Cancer Res., 66, 8026-8036 (2006).
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Brameld, Vernon T. Phan, Erik Verner, Timothy D. Owens, Yan Xing, Danny Tam,
Jacob LaStant, Kwan Leung, Dane E. Karr, Ronald J. Hill, Mary E. Gerritsen,
David M. Goldstein, Jens Oliver Funk, and J. Michael Bradshaw. The Irreversible
Covalent Fibroblast Growth Factor Receptor Inhibitor PRN1371 Exhibits Sustained
Inhibition of FGFR after Drug Clearance Mol Cancer Ther. 2017, 16(12); 2668–76.
Nakamura, S., et al. Application of bromodeoxyuridine (BrdU) and anti-BrdU
monoclonal antibody for the in vivo analysis of proliferative characteristics
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11. Wilson, G., Cell kinetic studies using a monoclonal antibody to bromodeoxyuridine. Methods Mol. Biol. 1998, 80, 255-266
12. Gray, J. (Ed), Special Issue: Monoclonal antibodies against bromodeoxyuridine Cytometry 1985, Vol. 6(6)
13. Gutschalk, C.M., et al. ‘Granulocyte Colony-Stimulating Factor and Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Promote Malignant Growth of Cells from Head and Neck Squamous Cell Carcinomas In vivo.’ Cancer Res., 66, 8026-8036 (2006).
14. Gray, J. (Ed), Special Issue: Monoclonal antibodies against bromodeoxyuridine Cytometry 1985, Vol. 6(6)
京公网安备 11010802028692号