一 细胞增殖检测的意义

细胞增殖是生物体的重要生命特征，是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。监测细胞群的生长对细胞的状态研究很有必要。科研工作者们经常需要检测细胞增殖情况，比如验证抗肿瘤药物的药效时，监测细胞增殖及存活情况；研究肿瘤侵袭与转移模型时，分析细胞转移或侵袭的路径；分析创伤的修复或组织的重建时，检测细胞生长情况等等。检测细胞增殖及活性变化则可以很好的反映细胞的生长状况。

 

二 细胞增殖的研究方法

细胞增殖的研究方法有很多种，根据检测原理不同，主要分为DNA合成检测法、代谢活性检测法、细胞增殖标志物检测法等。本文重点介绍DNA合成检测之Brdu检测法，传统DNA合成检测方法使用胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入DNA，然后通过放射自显影或闪烁计数对DNA进行定量，该方法由于存在放射性物质、实验周期长、操作繁琐，且需要昂贵的设备，目前已被BrdU（5-Bromo-2-deoxyuridine，5-溴脱氧尿嘧啶核苷）检测方法取代，BrdU作为一种胸苷类似物，可选择性地掺入增殖细胞的DNA中，而且可稳定存在，并带到子代细胞中，细胞经过固定和变性处理后，可用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量，从而判断细胞的增殖能力。

BrdU分子结构

 

小编整理汇总了常见细胞增殖检测方法，详见下表。

 

细胞增殖检测方法汇总

方法分类	检测方法	检测原理
DNA合成检测	Brdu检测法	BrdU是胸腺嘧啶核苷的类似物，能够在细胞增殖时期代替胸苷掺入增殖细胞的DNA中，而后利用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量，从而判断细胞增殖能力
DNA合成检测	胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）渗入法	用同位素3H标记TdR作为DNA合成前体掺入DNA合成代谢过程，通过测定放射性强度，反应细胞DNA代谢及增殖情况
代谢活性检测	MTT比色法	在活细胞生长和增殖过程中，线粒体内的脱氢酶可将黄色的MTT分解成蓝紫色的Formazan结晶，再利用酶标仪测定，以反映出活细胞数目，间接反应细胞增殖情况
细胞增殖标志物检测	Ki67,PCNA,MCM-2等相关抗原检测	通过观察增殖细胞中表达但非增殖细胞中不存在的特定蛋白质，来反映细增殖情况
荧光染料检测	羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）检测法	CFSE是一种荧光染料，脂溶性高，进入细胞，可以与胞内氨基酸发生不可逆的结合，在细胞的分裂过程中能进入子代细胞，同时荧光强度减半，再用流式细胞仪或荧光显微镜进行分析
实时动态电极阻抗检测	RTCA实时无标记细胞分析技术	将微电极列阵整合在细胞培养板孔底部，构建实时、动态、定量跟踪细胞形态和增殖分化改变的细胞阻抗检测传感系统。当微电极表面的细胞引起贴壁电极界面阻抗的改变时，这种改变与细胞的实时功能状态改变呈相关性

 

三 Exalpha Biologicals品牌BrdU检测试剂盒

因组织细胞内无内源性BrdU存在，可利用BrdU相关抗体来检测和定位掺入活跃增殖细胞新合成DNA的BrdU，Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒的优势在于使用细胞层作为固相，将BrdU试剂掺入微孔板中的细胞，除了对细胞增殖情况进行评估外，还可以从单个培养物中分析细胞数量、形态和细胞抗原等信息。同时Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒可通过试剂盒自带的固定/变性溶液一步完成细胞固定、透化和DNA变性等实验流程，大大缩短了实验时间。Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒中包含检测细胞增殖活性所需的所有组分、操作简便、无放射性、广泛的样本适用性，已得到众多科研工作者的青睐。

 

四 Exalpha Biologicals品牌BrdU检测试剂盒优势

简便：提供预稀释的滴管瓶，现用现配

安全：无放射性成分

完整：包含缓冲液、酶、阳性对照玻片和染色参考玻片

灵活：可用于任何物种组织样本

灵敏：极低的背景干扰

经济：成本低，高通量，多种规格

 

经BrdU处理的小鼠小肠免疫组织化学染色图

 

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参考文献

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• Eleni Venetsanakos, Ken A. Brameld, Vernon T. Phan, Erik Verner, Timothy D. Owens, Yan Xing, Danny Tam, Jacob LaStant, Kwan Leung, Dane E. Karr, Ronald J. Hill, Mary E. Gerritsen, David M. Goldstein, Jens Oliver Funk, and J. Michael Bradshaw. The Irreversible Covalent Fibroblast Growth Factor Receptor Inhibitor PRN1371 Exhibits Sustained Inhibition of FGFR after Drug Clearance Mol Cancer Ther. 2017, 16(12); 2668–76.
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