生物制品中的宿主细胞残留蛋白会导致过敏反应或潜在毒性等不良临床反应风险。因此必须建立合适的HCP检测验证方法来严格控制生物制品的质量。目前生物制品行业多以商业化的通用型HCP ELISA试剂盒来检测产品中的宿主蛋白残留（如Cygnus Technologies）。但宿主细胞的分泌型蛋白和部分死亡细胞释放的结构蛋白成分复杂，不同的工艺，加上相关基因产物需要经过独特的翻译后修饰，这些都大大增加了HCP的品种数量和生化复杂性。因此，通用型商品化HCP ELISA试剂盒中的多克隆抗体对宿主残留蛋白的特异性问题很难进行评估。若商品化ELISA试剂盒中的多克隆抗体特异性和适用性不够高，则会带来漏检HCP的风险，从而对生物制品质量安全带来风险。

因此，世界各地的监管部门比如FDA，CFDA对生物制品企业使用的商品化HCP ELISA试剂盒需要提供相关证明，需要证明该ELISA试剂盒中使用的抗体与已知工艺流程中发现的大量HCPs可以广泛反应，即试剂盒适用性或抗原覆盖率验证。在申报临床实验时每个企业都需要提供相关的数据来证明这一点，进而继续进行接下来的研发工作。

目前，做此项验证，被广泛认知的方法是传统2D-WB法，是基于等电点和分子量不同的原理，蛋白在凝胶上通过SDS-PAGE方法被分离。其中一张胶被银染，另一张被转到PVDF膜上，并结合ELISA试剂盒中的抗体进行Western Blotting检测。两张图片通过电子手段进行叠加，然后由计算机分析覆盖率。由于在实验方法上存在一定局限性，有一些无法避免的缺陷。

2D-WB法的局限性

Ø  灵敏度低，只适用于上游样品的分析；

Ø  样品需要经过变性处理，一些表位可能会被破坏而不能被抗体识别；

Ø  银染的胶与WB膜只能通过人工匹配操作，存在人为误差；

Ø  银染与WB的灵敏度本身存在差异，导致可信度不够高；

Cygnus Technologies Inc.是美国的一家生物技术公司，该公司专注于为生物制药和生物技术等企业提供高度专业化的用于研发和质量检测过程中的分析产品。作为公认的生物污染物（例如宿主残留蛋白HCP）检测专家，Cygnus向全球客户提供了不同种类经过严格验证和广泛识别的ELISA试剂盒和免疫分析试剂。同时，作为生物污染物分析中的企业，Cygnus还可以向客户提供专业的专属抗体及试剂盒开发和验证等服务。具体服务项目包括试剂盒适用性（抗原覆盖率）验证服务和专属性试剂盒开发服务。

Cygnus除了传统的2D-WB的验证服务以外，还独家推出的更高特异性验证方法，Cygnus还研发更高特异性检测的方法：AAE（Antibody Affinity Extraction）。该方法在样本处理方式上做了非常大的改进，能够弥补2D-WB的缺陷，具有更高的特异性和灵敏度。

AAE新型验证方法优势

ü  独特样本处理方法：更高的灵敏度和特异性

ü  可用于纯化后的样本分析，真正反映试剂盒对工艺过程中或终产物中残留的覆盖率

ü  可直接通过仪器分析避免人工误差，结果可信度更高

ü  已被多国监管机构认可，如CFDA、FDA、EMA

此外，Cygnus的专利抗体生产和亲和纯化技术能够生产出高灵敏度和广谱反应的多克隆抗体及相关试剂盒产品。还能为广大的生物制品企业提供后续的专属检测产品的开发服务：

专属HCP检测抗体定制服务

Ø  提供全部项目报告

Ø  约5~6L抗血清

Ø  抗体亲和纯化的全部技术

专属HCP试剂盒开发服务

Ø  完整的ELISA试剂盒开发及检测报告

Ø  转让试剂盒生产工艺

Ø  提供试剂盒有效性鉴定的技术指导

北京西美杰科技有限公司（以下简称西美杰）作为Cygnus在中国总代理，在试剂盒开发和验证服务中可为客户提供一站式服务，包括服务技术咨询，样本申报清关寄送，服务进展查询，服务报告整理接收等，大量节省了客户的时间。西美杰已经成功为中国生物制药多个客户提供了满意的HCP特异性验证服务，助客户高效临床报批一臂之力。

西美杰现货供应——Cygnus热销经典试剂盒

如CHO，E.coli，Pichia pastoris，Vero，293等细胞株HCP检测试剂盒

Protein A检测系列

DNA残留等检测试剂盒及相关试剂

 如您对工艺过程中的各类生物污染物检测产品或者服务感兴趣，请拨打全国服务热线400-050-4006进行咨询。