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DENARASE® High Salt 是一种经过生物工程改造的野生型 Serratia marcescens 内切酶,通常用于生物工艺中的 DNA 去除。与野生型 DENARASE® 相比,该酶的几个氨基酸被替换以提高其耐盐性,而不会失去其对核酸的特异性。DENARASE® High Salt 在更广泛的盐浓度和 pH 范围内保持更高的活性,为客户提供了更大的工艺灵活性,同时为病毒载体制造工艺提升成本效益,尤其是在需要较高盐浓度的条件下。由于与野生型核酸内切酶具有很高的相似性,DENARASE® High Salt 可以使用与野生型酶相同的核酸内切酶 ELISA试剂盒进行检测,例如DENARASE® ELISA试剂盒,Cygnus核酸内切酶残留检测试剂盒(EonucleaseGTP ELISA,货号F960)。
DENARASE® High Salt的生产采用c-LEcta成熟的专利DENARASE®生产工艺,该工艺采用革兰氏阳性芽孢杆菌菌株(Bacillus.sp.)表达,大大降低了内毒素残留风险。该酶按照ISO 9001标准生产,不使用抗生素和动物源性原料或TSE/BSE风险原料。
DENARASE® High Salt酶特性
DENARASE® High Salt是专为在更高、与工艺相关的盐浓度下实现DNA清除活性而设计的。该工程酶在0-500 mM一价阳离子浓度范围内具有活性(见图1)。
图1. NaCl对酶活性影响
镁离子(Mg2+)是确保DENARASE® High Salt发挥酶活性所必需的辅因子。DENARASE® High Salt在低镁离子浓度(5-25 mM Mg2+)下具有基本活性,但在高镁离子浓度(>25 mM Mg2+)下酶活性会降低。因此,在使用DENARASE® High Salt时,应确保镁离子浓度在适当范围内(见图2)。
图2. Mg2+对酶活性影响
DENARASE® High Salt质量参数
DENARASE® High Salt产品为液体形式,配方为20 mM Tris-HCl(pH 7.4±0.2)、250 mM NaCl、5 mM MgCl2和50%(体积比)甘油。
项目 |
方法 |
质量标准 |
产品性状 |
直接观测 |
澄清透明液体 |
酶活性 |
光学测定1 |
>250 U/µL |
纯度 |
SDS-PAGE和银染 |
≥ 99% |
比活性 |
光学测定单位蛋白具有的酶活性即280 nm下44,600 L x mol-1 x cm-1的摩尔消光系数 |
>5 x 105 U/mg |
内毒素 |
LAL-Test,参考 Ph. Eur. 2.6.14, 方法C |
<0.25 EU/kU |
总菌落数 |
TAMC/TYMC 参照 Ph. Eur. 2.6.12 |
需氧菌: < 5 cfu/200 µL 酵母: < 5 cfu/200 µL |
1. Unit定义: 每个活性单位 (U) 是指在37 °C ,pH 8.0 条件下,在30分钟内将鲑鱼精DNA消化至相当于ΔA260nm值为1.0 的酸溶性寡聚核苷酸。
DENARASE® High Salt产品参数
- 分子量: 27 kDa
- 最适pH: pH 7.4 - 9.0
- 最适反应温度:37 °C
- 等电点(pI):7.831
- 辅因子:Mg2+
DENARASE® High Salt订购信息
品名 |
货号 |
规格 |
DENARASE High Salt 25 kU |
22002-25k |
25 kU |
DENARASE High Salt 100 kU |
22002-100k |
100 kU |
DENARASE High Salt 500 kU |
22002-500k |
500 kU |
DENARASE High Salt 1000 kU |
22002-1000k |
1000 kU |
DENARASE High Salt 5000 kU |
22002-5000k |
5000 kU |
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